PCR-meetod (polümeraasi ahelreaktsioon) on kaasaegse DNA-diagnostika "kulla standard" - väga tundlik molekulaarbioloogia meetod. PCR-meetodit kasutatakse meditsiinis, geneetikas, kriminoloogias ja muudes valdkondades. Seda kasutatakse tihti ja edukalt paljude nakkushaiguste diagnoosimiseks.
Nakkushaiguste diagnoosimine PCR abil
PCR-test võimaldab avastada uuritavas materjalis mitte ainult patogeeni ise, vaid isegi üksainus võõr-DNA-d. Uuritud (bioloogiline) materjal on: venoosne veri, epiteelirakud ja suguelundite, sperma, sülje, röga ja muude bioloogiliste ekskrementide saladus. Nõutav bioloogiline materjal on määratud väidetava haigusega.
Loomulikult on meie aja järgi PCR-meetod võimas diagnostiliseks vahendiks. Võimalik, et uuringu ainus puudus on selle kõrge hind.
Haigusloendis, mille olemasolu saab kindlaks määrata PCR-meetodiga:
- viiruslik ja bakteriaalne kopsupõletik;
- tuberkuloos;
- leetrid, punetised, parotiit;
- igasugune nakkuslik hepatiit;
- salmonelloos, difteeria;
- Helikobakterioos ja sooleinfektsioonidest põhjustatud haigused;
- STD (sugulisel teel levivad haigused): gonorröa, klamüüdia, ureaplasmoos, süüfilis, AIDS, suguelundite herpes, gardnerellez jt.
STI skriinimine PCR meetodil
Erinevalt traditsioonilistest analüüsidest võimaldab PCR-meetod ennetada sugulisel teel levivate nakkuste levikut isegi siis, kui nende sümptomid on täiesti puudulikud. Bioloogilise materjali kogumisel eemaldatakse naised emakakaela kanali epiteelirakkudele, mehed - ureetra kraapimine. Vajadusel teostab PCR meetod venoosse veri uuringu.
Seega on STL-i katse PCR-meetodi abil võimalik tuvastada:
- inimese immuunpuudulikkuse viirus (HIV);
- kahvatu treponemus (süüfilise põhjustav aine);
- Herpes simplex viirus ja tsütomegaloviirus;
- inimese papilloomiviirus (HPV);
- klamüüdia, toksoplasmi, mükoplasma, ureaplasma ja muude seksuaalsete infektsioonide raviks.
Kui PCR-analüüs tehakse korrektselt, on valepositiivsete tulemuste tõenäosus välistatud. Eraldi tuleks mainida inimese papilloomiviirust (HPV) ja PCR-meetodi tähtsust selle diagnoosimiseks. Erinevalt onkotsütoloogilisest mustusest võib PCR-meetod määrata kindlaks spetsiifilise HPV tüübi, eriti selle onkogeensete tüüpide 16 ja 18, mille olemasolu ohustab sellist tõsist ja sageli surmavat haigust nagu emakakaela vähk . Onkogeensete HPV tüüpide õigeaegne tuvastamine PCR-meetodiga annab sageli võimaluse vältida emakakaelavähi tekkimist.
Immunoensüümide analüüs (ELISA) ja polümeraasi ahelreaktsioon (PCR): plussid ja miinused
Milline diagnostiline meetod on parem: PCR või ELISA? Sellele küsimusele õiget vastust ei ole, sest sisuliselt on nende kahe uuringu abil diagnoos erinevad. Ja sagedamini rakendatakse IFA ja PTSR-i kompleksina.
PCR-katse on vajalik nakkuse spetsiifilise põhjustava aine kindlaksmääramiseks, seda saab tuvastada kohe pärast nakatamist hoolimata haiguse sümptomaatilise manifestatsiooni puudumisest. See meetod sobib peidetud ja krooniliste bakteriaalsete ja viirusnakkuste tuvastamiseks.
Erinevalt PCR-tehnoloogiast on ELISA meetod konstrueeritud nii, et see ei tuvasta nakkuse põhjustaja, vaid organismi immuunvastust sellele, st konkreetse patogeeni olemasolu ja hulga antikehade tuvastamiseks. Sõltuvalt avastatud antikehade tüübist (IgM, IgA, IgG) võib määrata nakkusprotsessi arengujärgu.
Mõlemad meetodid, PCR ja ELISA on kõrge usaldusväärsusega (vastavalt 100 ja 90%). Siiski on oluline märkida, et ELISA analüüs annab mõnel juhul valepositiivse tulemuse (kui inimene on haigestunud teatud haigusega varem) või vale-negatiivne (kui infektsioon on suhteliselt hilja).